人参茎叶总皂苷

人参茎叶总皂苷Renshen Jingye ZongzaoganTOATAL GINSENOSIDE OF GINSENGSTEMS AND LEAVES
    本品为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的干燥茎叶经加工制成的总皂苷。
    【制法】取人参茎叶，切成1～2cm段，加水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，煎液滤过，合并滤液，通过D101型大孔吸附树脂柱，水洗脱至无色，再用60%乙醇洗脱，收集60%乙醇洗脱液，滤液浓缩至相对密度为1.06～1.08（80℃）的清膏，干燥，粉碎，即得。
    【性状】本品为黄白色或淡黄色的粉末；微臭，味苦；具吸湿性。
    本品在甲醇或乙醇中易溶，在水中溶解，在乙醚或石油醚中几乎不溶。
    【鉴别】（1）取本品0.1g，置试管中，加水2ml，用力振摇，产生持久性泡沫。
    （2）取本品0.1g，加甲醇10ml使溶解，作为供试品溶液；另取人参茎叶对照药材1g，加水100ml，煎煮2小时，滤过，滤液通过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1cm，柱高为15cm），用水洗至无色，弃去水液，再用60%乙醇20ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣用甲醇10ml使溶解，作为对照药材溶液。再取人参皂苷Rgl对照品与人参皂苷Re对照品，加甲醇溶解制成每1ml各含2mg的混合溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述三种溶液各2μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15：40：22：10）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，分别置日光和紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，日光下显相同颜色的斑点，紫外光下显相同颜色的荧光斑点。
    【检查】粒度 依法检查（通则0982第二法），能通过120目筛的粉末不少于95%。
    干燥失重 取本品，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过 5.0%（通则 0831）。
    总灰分 不得过1.5% （通则2302）。
    炽灼残渣 不得过1.5%（通则0841）。
    重金属及有害元素 照铅、镉、砷、汞、铜测定法（通则2321）测定，铅不得过2mg/kg；镉不得过0.2mg/kg；砷不得过2mg/kg；汞不得过0.2mg/kg；铜不得过20mg/kg。
    有机氯农药残留量 照农药残留量测定法（通则2341有机氯类农药残留测定法——第一法）测定。六六六（总BHC）不得过0.1mg/kg；滴滴涕（总DDT）不得过1mg/kg；五氯硝基苯（PCNB）不得过0.1mg/kg。
    【特征图谱】照高效液相色谱法（通则0512）测定。
    色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（柱长为25cm，内径为4.6μm，粒径为5μm，载碳量11%）；以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；柱温为30℃；流速为每分钟1.3ml，检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于6000，按人参皂苷Rd峰计算应不低于200 000。
    
    参照物溶液的制备 取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品和人参皂苷Rd对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml各含人参皂苷Rg1 0.3mg、人参皂苷Re 0.5mg和人参皂苷Rd 0.2mg的溶液，即得。
    供试品溶液的制备 取本品20mg，精密称定，置10ml量瓶中，加甲醇超声使溶解并稀释至刻度，滤过，取续滤液，即得。
    测定法 分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，记录60分钟的色谱图，即得。
    供试品特征图谱中应有6个特征峰，其中3个峰应分别与相应的参照物峰保留时间相同，与人参皂苷Rd参照物峰相应的峰为S峰，计算特征峰3～6的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±5%之内。规定值为：0.93（峰3）、0. 95（峰 4）、0. 97（峰 5）、1. 00（峰 6）。
    
    【含量测定】人参茎叶总皂苷 对照品溶液的制备 取人参皂苷Re对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，即得。
    标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液20μl、40μl、80μl、120μl、160μl、200μl，分别置于具塞试管中，低温挥去溶剂，加入1%香草醛高氯酸试液0.5ml，置60℃恒温水浴上充分混匀后加热15分钟，立即用冰水冷却2分钟，加入77%硫酸溶液5ml，摇匀；以相应试剂作空白，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在540mn波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线。
    测定法 取本品约50mg，精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取50μl，照标准曲线制备项下的方法，自“置于具塞试管中”起依法操作，测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中人参皂苷Re的量，计算结果乘以0.84，即得。
    本品按干燥品计算，含人参总皂苷以人参皂苷Re（C48H82018）计，应为 75%～95%。
    人参皂苷Rg1、Re、Rd照高效液相色谱法（通则0512）测定。
    色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1 %磷酸溶液为流动相B，按〔特征图谱〕项表中梯度进行洗脱；检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Re峰计算应不低于3000。
    对照品溶液的制备 取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品和人参皂苷Rd对照品适量，精密称定，加甲醇制成1ml中含人参皂苷Rg1 0.30mg、人参皂苷Re 0.50mg和人参皂苷Rd 0.20mg的混合溶液。
    供试品溶液的制备 取〔特征图谱〕项下的供试品溶液，即得。溶液5～20μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
    本品按干燥品计算，含人参皂苷Rg1（C42H72014）、人参皂苷Re（C48H82018）和人参皂苷Rd（C48H82018）的总量应为30%～45%。
    【贮藏】密闭，置干燥处。
    【制剂】口服。