蕲蛇

来源：一部分类：药材和饮片笔画：15 页码：372
蕲蛇QisheAGKISTRODON    本品为蝰科动物五步蛇Agkistrodonacutus（Güenther）的干燥体。多于夏、秋二季捕捉，剖开蛇腹，除去内脏，洗净，用竹片撑开腹部，盘成圆盘状，干燥后拆除竹片。
    【性状】本品卷呈圆盘状，盘径17～34cm，体长可达2m。头在中间稍向上，呈三角形而扁平，吻端向上，习称“翘鼻头”。上腭有管状毒牙，中空尖锐。背部两侧各有黑褐色与浅棕色组成的“V”形斑纹17～25个，其“V”形的两上端在背中线上相接，习称“方胜纹”，有的左右不相接，呈交错排列。腹部撑开或不撑开，灰白色，鳞片较大，有黑色类圆形的斑点，习称“连珠斑”；腹内壁黄白色，脊椎骨的棘突较高，呈刀片状上突，前后椎体下突基本同形，多为弯刀状，向后倾斜，尖端明显超过椎体后隆面。尾部骤细，末端有三角形深灰色的角质鳞片1枚。气腥，味微咸。
    【浸出物】照醇溶性浸出物测定法（通则2201）项下的热浸法测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于10.0%。
    饮片
    【炮制】蕲蛇  去头、鳞，切成寸段。
    蕲蛇肉  去头，用黄酒润透后，除去鳞、骨，干燥。
    酒蕲蛇  取净蕲蛇段，照酒炙法（通则0213）炒干。
    每100kg蕲蛇，用黄酒20kg。
    本品为段状。棕褐色或黑色，略有酒气。
    【鉴别】聚合酶链式反应法。
    模板DNA提取  取本品0.5g，置乳钵中，加液氮适量，充分研磨使成粉末，取0.1g，置1.5ml离心管中，加入消化液275μl[细胞核裂解液200μl，0.5mol/L乙二胺四醋酸二钠溶液50μl，蛋白酶K（20mg/ml）20μl，RNA酶溶液5μl]，在55℃水浴保温1小时，加入裂解缓冲液250μl，混匀，加到DNA纯化柱中，离心（转速为每分钟10000转）3分钟；弃去过滤液，加入洗脱液800μl[5mol/L醋酸钾溶液26μl，1mol/LTris-盐酸溶液（pH7.5）18ml，0.5mol/L乙二胺四醋酸二钠溶液（pH8.0）3μ1，无水乙醇480μl，灭菌双蒸水273μl]，离心（转速为每分钟10000转）1分钟；弃去过滤液，用上述洗脱液反复洗脱3次，每次离心（转速为每分钟10000转）1分钟；弃去过滤液，再离心2分钟，将DNA纯化柱转移入另一离心管中，加入无菌双蒸水100μl，室温放置2分钟后，离心（转速为每分钟10000转）2分钟，取上清液，作为供试品溶液，置零下20℃保存备用。另取蕲蛇对照药材0.5g，同法制成对照药材模板DNA溶液。
    PCR反应  鉴别引物：5'GGCAATTCACTACACAGCCAA-CATCAACT3'和5'CCATAGTCAGGTGGTTAGTGATAC3'。PCR反应体系：在2004离心管中进行，反应总体积为25μl，反应体系包括10×PCR缓冲液2.5μl，dNTP（2.5mmol/L）2ml，鉴别引物（10μmol/L）各0.5μl，高保真TaqDNA聚合酶（5U/ml）0.2μl，模板0.5μl，无菌双蒸水18.8μl。将离心管置PCR仪，PCR反应参数：95℃预变性5分钟，循环反应30次（95℃30秒，63℃45秒），延伸（72℃）5分钟。
    电泳检测  照琼脂糖凝胶电泳法方法2（通则0541），胶浓度为1%，胶中加入核酸凝胶染色剂GelRed；供试品与对照药材PCR反应溶液的上样量分别为8ml，DNA分子量标记上样量为2μl（0.5μg/μl）。电泳结束后，取凝胶片在凝胶成像仪上或紫外透射仪上检视。供试品凝胶电泳图谱中，在与对照药材凝胶电泳图谱相应的位置上，在300～400bp应有单一DNA条带。
    【性味与归经】甘、咸，温；有毒。归肝经。
    【功能与主治】祛风，通络，止痉。用于风湿顽痹，麻木拘挛，中风口眼斜，半身不遂，抽搐痉挛，破伤风，麻风，疥癣。
    【用法与用量】3～9g；研末吞服，一次1～1.5g，一日2～3次。
    【贮藏】置干燥处，防霉，防蛀