3415 类A血型物质测定法

3415 类A血型物质测定法
    （血凝抑制法）
    本法系用标准类A血型物质和供试品分别与抗A血型血清反应，通过比较血凝反应终点，测定供试品中类A血型物质含量。
    1%A型人红细胞悬液  将6人份A型血等量混合，加适量生理氯化钠溶液混匀，以每分钟2000转离心10分钟，倾去上清液，用生理氯化钠溶液洗3次，吸取沉积红细胞1ml，加生理氯化钠溶液99ml，混匀，制成1%A型人红细胞悬液。
    标准类A血型物质溶液的制备  将标准品制成每1ml中含1mg的标准溶液。取1组10支直径9mm的试管，将标准溶液用生理氯化钠溶液做2倍系列稀释，体积为0.1ml，由1/100稀释度（每1ml含0.01mg）开始。
    供试品溶液的制备  取1组10支直径9mm的试管，将供试品用生理氯化钠溶液做2倍系列稀释，体积为0.1ml，由供试品开始。
    抗A血型血清试验剂量的测定  取1组10支直径9mm的试管，将抗A血型血清用生理氯化钠溶液做2倍系列稀释，体积为0.1ml，由1/2稀释度开始，加1%A型人红细胞悬液0.1ml；同时取生理氯化钠溶液0.1ml与1%A型人红细胞0.1ml作为阴性对照。摇匀，室温放置15分钟，以每分钟1500转离心1分钟，根据细胞沉降压缩情况观察凝集程度。以呈现完全凝集（+ + + +）的抗A血型血清的最高稀释度为1个抗体试验剂量。
    测定法  在每稀释度供试品及标准类A血型物质溶液中分别加含2个抗体试验剂量的抗A血型血清0.1ml。摇匀，36.5~37.5℃放置10分钟，再于上述各管中分别加入1%A型人红细胞悬液0.1ml，摇匀36.5~37.5℃放置15分钟，以每分钟1500转离心1分钟，根据红细胞沉降压缩情况观察凝集程度。
    结果判定  供试品呈现完全血凝抑制（终点）的最高稀释倍数乘以对照组呈现相似血凝抑制的最高倍稀释管的血型物质含量，即为每1ml供试品所含类A血型物质的质量（mg）。