0872 合成多肽中的醋酸测定法

0872 合成多肽中的醋酸测定法
    本法系用液相色谱法（通则0512）测定合成多肽中醋酸或醋酸盐的含量。除另有规定外，按下列方法测定。
    对照溶液的制备 取冰醋酸适量，精密称定，用流动相A-流动相B（95：5）的混合溶液定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液（浓度可随供试品中醋酸的含量作适当调整）。
    供试品溶液的制备 照各品种项下规定的方法制备（取样量应根据其醋酸含量而定）。
    色谱条件及系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（250mm×4.6mm，5μm）；以磷酸溶液（在1000ml水中加磷酸0.7ml，用0.42%氢氧化钠溶液调节pH值至3.0）为流动相A；甲醇为流动相B；流速为每分钟1.2ml；检测波长为210nm。按下表进行梯度洗脱。理论板数按醋酸峰计算应不低于2000。醋酸峰的保留时间约在3～4分钟。
    
    测定法 精密量取对照溶液和供试品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算多肽中醋酸的含量。