3501 重组乙型肝炎疫苗（酵母）体外相对效力检查法

3501 重组乙型肝炎疫苗（酵母）体外相对效力检查法
    本法系以酶联免疫法测定供试品中的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）含量，并以参考品为标准，采用双平行线分析法计算供试品的相对效力。
    试剂（1）PBS（pH7.2）  称取氯化钠8.850g、磷酸二氢钠（NaH2PO4•2H2O）0.226g和磷酸氢二钠（Na2HPO4•12H2O）1.698g，加适量水溶解，调pH值至7.2，加水稀释至1000ml。
    （2）供试品处理液  量取20%二乙醇胺1.25ml和10% Triton X-100 0.20ml，加PBS 8.55ml，混匀备用。
    （3）供试品稀释液  称取牛血清白蛋白10.0g，加PBS溶解并稀释至1000ml，备用。
    参考品溶液及供试品溶液的制备  精密量取参考品及供试品各0.1ml，分别加入0.1ml供试品处理液，加盖混匀，在20~28℃静置30~35分钟。将处理后的参考品和供试品分别以供试品稀释液进行适当稀释，稀释后取1：2000、1：4000、1：8000、1：16000、1：32000及其他适宜稀释度进行测定，每个稀释度做双份测定。阴性对照为供试品稀释液（双份），阴性对照和阳性对照均不需稀释。
    测定法  按试剂盒用说明书进行。试剂盒阴性和阳性对照吸光度均值应在试剂盒要求范围内，试验有效。3次测定的数据均用量反平行线测定法（通则1431）计算相对效力。以3次相对效力的几何均值为其体外相对效力。以参考品为标准，供试品相对效力不小于0.5，判为合格。