3426 人红细胞抗体测定法

3426 人红细胞抗体测定法
    （微量板法）
    本法系依据红细胞与红细胞抗体结合后发生凝集的原理，通过比较血凝反终点，测定供试品中人红细胞抗体效价。
    试剂  1%O型红细胞悬液  取3例或3例以上O型抗凝血混合，采血后7天内使用。用前以理氯化钠溶液洗涤3次，末次以每分钟2000转离心10分钟，取压积红细胞适量，用生理氯化钠溶液制成1%浓度备用。
    测定法  在“V”形、底角呈90°的96孔微量板上，用生理氯化钠溶液将供试品做2倍系列稀释，每个供试品做2排，每孔加入50μl。再向每孔加入1%O型红细胞悬液50μl，轻拍微量板30秒混匀。室温静置3小时观察结果，同时用生理氯化钠溶液替代供试品，同法操作，作阴性对照。
    结果判定  将微量板置于白色背景之上，将供试品与阴性对照孔比较，红细胞沉于底部成一规则的圆点而孔壁未粘有红细胞判为阴性；孔壁上均匀附着1层红细胞，或红细胞未全部沉于底部，部分附着于孔壁上均判为阳性。以供试品出现阳性的最高稀释倍数为其红细胞抗体的效价。如同批供试品前后排结相差在1个以上稀释度时应重试。相差1个稀释度时，则以2排结果中出现阳性的最高稀释度为该供试品的红细胞抗体效价。