PDF 

3411 牛血清白蛋白残留量测定法

来源:三部   分类:三部通则   页码:507  
3411 牛血清白蛋白残留量测定法
本法系采用酶联免疫法测定供试品中残余牛血清白蛋白(BSA)含量。 供试品溶液的制备 供试品如为冻干剂型,测前应按标示量溶后混匀,室温静置30分钟,检测前应再次混匀。供试品如为液体剂型可直接用于检测。 干扰试验 首次采用该法检测的供试品进行干扰试验。 制备溶液Ⅰ (供试品倍比稀释)、溶液Ⅱ供试品和30ng/ml内控标准品等量混合)和溶液Ⅲ(30ng/ml的内控标准品倍比稀释)。当供试品溶液BSA量高于试剂盒测定范围中点时,则2倍稀释后制备溶液Ⅰ和溶液Ⅱ。溶液Ⅰ、溶液Ⅱ可倍比稀释测定,溶液Ⅲ应多孔测定(至少10孔以上),并在试验间均匀添加。按测定法操作,分别测定溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ的BSA含量,溶液Ⅰ与溶液Ⅱ的含量之差应在溶液Ⅲ含量测定值的95%可信区间内,表明供试品不会对测法产生干扰作用。 测定法 按试剂盒说明书进行,并采用试剂盒提供的供试品稀释液稀释供试品,供试品应至少进行2个稀释度测定,每个稀释度做双平行测定。试剂盒标准品的吸光度、内控参考品测定值、标准品线性相系数、双孔测定吸光度均应在试剂盒要求范围内,试验有效。以标准品溶液的浓度对其相应的吸光度作直线回归,将供试品的吸光度代入直线回归方程,再乘以稀释倍数,计算出供试品中BSA量。 【附注】(1)当同一供试品的低稀释度吸光度明显低于高稀释度吸光度时,可能存在HOOK效应或操作失误,需重试或调整稀释倍数进行检测。 (2)测定BSA含量的容器具应专用,防止实验室中BSA污染。

(c)蒲标网 - 中国药典、药品标准、法规在线查询 ( 津ICP备15007510号 )