3120 人血液制品中糖及糖醇测定法

3120 人血液制品中糖及糖醇测定法
    本法系用高效液相色谱法测定人血液制品中糖及糖醇含量。
    照离子色谱法（通则0513）测定。
    色谱条件与系统适用性试验  用苯乙烯-二乙烯基苯共聚物为基质的阳离子交换色谱柱（H+），粒度9μm或8μm，内径7.8mm，柱长300mm；柱温50℃（测定蔗糖含量时，柱温为20～30℃）；流动相为0.004mol/L硫酸溶液，流速为每分钟0.8ml；示差折光检测器。取2%麦芽糖1ml和1.5%磺基水杨酸1ml的混合物20μl，注入色谱柱，记录色谱图，麦芽糖与磺基水杨酸两峰间的分离度应大于1.5，拖尾因子按麦芽糖峰计算应为0.95～1.50。
    对照品溶液的制备 （1）麦芽糖对照品溶液  分别取经减压干燥至恒重的麦芽糖对照品1.0g、2.0g、3.0g，精密称定，各置100ml量瓶中，分别加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
    （2）葡萄糖对照品溶液  分别取经减压干燥至恒重的葡萄糖对照品0.5g、1.0g、1.5g，精密称定，各置100ml量瓶中，分别加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
    （3）山梨醇对照品溶液  分别取经减压干燥至恒重的山梨醇对照品0.5g、1.0g，1.5g，精密称定，各置100ml量瓶中，分别加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
    （4）蔗糖对照品溶液  分别取经减压干燥至恒重的蔗糖对照品1.0g、2.0g、3.0g，精密称定，各置100ml量瓶中，分别加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
    供试品溶液的制备  精密量取供试品1ml，加1.5%磺基水杨酸4.0ml，混匀，室温放置至少2小时，以每分钟3000转离心10分钟，取上清液，即得。
    测定法  精密量取对照品溶液与供试品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；进样量为20μl。
    以各对照品溶液浓度（g/L）对其相应的峰面积作直线回归，求得直线回归方程，计算出供试品溶液中糖或糖醇含量（A），再按下列公式计算：
         供试品糖或糖醇含量（g/L）＝A×n
    式中  A为供试品溶液中糖或糖醇含量，g/L；
          n为供试品稀释倍数。
    【附注】（1）根据供试品的糖含量，对照品和供试品的取量可做适当调整。
    （2）直线回归相关系数应不低于0.999。
    （3）不同厂家的阳离子交换色谱柱（H+）的流速、流动相、柱温等会有所不同，可根据色谱柱说明书对色谱条件进行适当调整。