梅毒快速血浆反应素诊断试剂

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梅毒快速血浆反应素诊断试剂Meidu Kuaisu Xuejiang Fanyingsu Zhenduan ShijiSyphilis Rapid Plasma Reagin (RPR)    本品系用性病实验室玻片试验（VDRL）抗原重悬于含有炭末的特制溶液中制成，检测人血清或血浆中的反应素，用于临床辅助诊断梅毒。
    1基本要求
    生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
    2制造
    2.1专用原材料
    2.1.1 VDRL抗原及VDRL缓冲盐水
    应符合本品附录的要求。
    2.1.2再混悬液
    为含有乙二胺四乙酸二钠、氯化胆碱、炭末、防腐剂的磷酸盐缓冲液。其中炭末直径应小于20μm。
    2.1.3纸卡
    白色纸卡上印制18mm直径圆圈若干个，纸卡应表面光滑，不渗水，不起毛，不吸附蛋白质。
    2.1.4专用滴头或相应器材
    使用专用滴头或相应器材，每滴量应符合要求。
    2.1.5阳性对照
    反应素检测为阳性的人血清、血浆或其他适宜的材料。
    2.1.6阴性对照
    反应素检测为阴性的人血清、血浆或其他适宜的材料。
    2.2制备程序
    2.2.1用VDRL缓冲盐水将VDRL抗原配成悬液。
    2.2.2离心弃去上清液，沉淀物以再混悬液制成均匀的灰黑色混悬液。
    2.2.3阳性对照
    选用反应素检测为阳性的5份以上人血清或血浆混合，经60℃、1小时处理后，除菌过滤，于2~8℃保存；也可选用其他适宜的阳性对照。
    2.2.4阴性对照
    选用反应素检测为阴性的5份以上人血清或血浆混合，经60℃、1小时处理后，除菌过滤，于2~8℃保存；也可选用其他适宜的阴性对照。
    2.3半成品检定
    按3.1项进行。
    2.4成品
    2.4.1分批
    应符合“生物制品分批规程”规定。
    2.4.2分装
    应符合“生物制品分装和冻干规程”，分装后保存于2~8℃。
    2.4.3规格
    应为经批准的规格。
    2.4.4包装
    应符合“生物制品包装规程”规定。
    3检定
    应在23~29℃环境下进行。
    3.1半成品检定
    3.1.1阴性参考品符合率
    用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。
    3.1.2阳性参考品符合率
    用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。
    3.1.3效价测定
    取标明效价的阳性参考血清3份，分别做2倍系列稀释，按“++++~+”或“-”判定凝集反应结果。待检RPR试剂与3份阳性参考血清反应，均应符合国家参考品的要求。
    3.2成品检定
    3.2.1外观
    RPR试剂应为灰黑色均匀悬液，不应有摇不散的凝块或杂质。
    3.2.2阴性参考品符合率
    按3.1.1项进行。
    3.2.3阳性参考品符合率
    按3.1.2项进行。
    3.2.4效价测定
    按3.1.3项进行。
    4保存及有效期
    于2~8℃避光保存。自包装之日起，按批准的有效期执行。
    5使用说明
    应符合“生物制品包装规程”规定和批准的内容。
    6附录
    性病实验室玻片试验（VDRL）抗原制造及检定方法。
    
    附录   性病实验室玻片试验（VDRL）抗原制造及检定方法
    本品系以纯化的心磷脂、卵磷脂和胆固醇按比例配制而成，供制备RPR试剂和TRUST试剂用。
    1基本要求
    生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。
    2制造
    2.1专用原材料
    2.1.1心磷脂、卵磷脂、胆固醇
    符合化学纯要求。
    2.1.2VDRL缓冲盐水（pH值为6.0±0.1）
    甲醛溶液（中性）	         0.5ml
    磷酸氢二钠（Na₂HPO4）	      0.037g
    磷酸二氢钾（KH₂PO4）	      0.17g
    氯化钠（NaCl）	            10.00g
    蒸馏水                     加至1000ml
    2.2制备程序
    2.2.1抗原配制
    含心磷脂0.030%、胆固醇0.9%和适量卵磷脂的乙醇溶液，混匀后密封保存。
    2.2.2抗原悬液配制
    用VDRL缓冲盐水将VDRL抗原稀释10倍，配成抗原悬液。检定用的VDRL抗原应不低于0.5ml，抗原悬液应于配制当天使用。
    3检定
    应在23~29℃环境下进行。
    3.1外观
    应为无色透明溶液，无沉淀或杂质。
    3.2血清学检定
    用国家参考品或经国家参考品标化的参考品进行检定，应符合要求。
    3.2.1玻片定性试验
    在玻片上2个并排圆圈（直径14mm）中各加0.05ml参考血清，再分别加入1滴（45滴/ml）待检及标准抗原悬液，摇动玻片4分钟，每分钟180次，在3分钟内于100倍的显微镜下观察结果。结果判定如下：
    阳性反应（+++~++++）：中等及大的凝块，溶液清亮（R）。	
    弱阳性反应（+~++）：可见小的颗粒聚集物（W）。
    可疑反应（±）：可见到细小粗糙物，分布不规则。
    阴性反应（-）：抗原颗粒均匀分布，无块状物（N）。
    血清学评定：待检抗原在阴性参考血清中应均为阴性。如出现可疑的阳性反应，可用标准抗原作对照进行重试。标准抗原阴性而待检抗原仍呈阳性者，判为不合格。待检抗原和标准抗原在同一份阳性血清中的反应相差“+”者为有意义的差异，这种差异应不高于阳性血清份数的25%，在阳性标准血清中，有1份出现阴性反应者，判为不合格。
    3.2.2玻片定量试验
    将3份强阳性血清用生理氯化钠溶液稀释成1：1、1：2、1：4、1：8、1：16、1：32，吸取每个稀释度的血清按3.2.1项进行测定。待检抗原的效价低于标准抗原效价2个稀释度者，判为不合格。
    4保存及有效期
    于23~29℃避光保存。自配制之日起，有效期为24个月。